生物實(shí)驗(yàn)室怎么防止氣溶膠污染？

目前可確定的新冠肺炎傳播途徑主要為直接傳播、氣溶膠傳播、結(jié)婚粗傳播。那么生物實(shí)驗(yàn)室如何防止氣溶膠污染？南寧銘力凈化工程為您詳解PCR實(shí)驗(yàn)室的氣溶膠污染防范要點(diǎn)。

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   PCR（聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)）技術(shù)的應(yīng)用和發(fā)展使得疾病診斷得到更有效的證據(jù)，尤其是熒光定量PCR的推廣與應(yīng)用，大大提高了檢測(cè)的靈敏性及準(zhǔn)確性。然而隨著該項(xiàng)技術(shù)在病原檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室的廣泛應(yīng)用，PCR實(shí)驗(yàn)室的氣溶膠污染問題逐漸引起人們關(guān)注。為了有效地避免PCR實(shí)驗(yàn)室DNA/RNA氣溶膠污染,獲得穩(wěn)定、可靠的檢驗(yàn)結(jié)果，防止出現(xiàn)假陽性，PCR實(shí)驗(yàn)室要建立嚴(yán)格的防污染措施和相應(yīng)的污染監(jiān)測(cè)體系來防范氣溶膠污染污染，一旦發(fā)現(xiàn)氣溶膠污染，要及時(shí)查找原因，并相應(yīng)解決污染問題。

一、實(shí)驗(yàn)室氣溶膠污染及其來源

   氣溶膠污染是指實(shí)驗(yàn)室在長(zhǎng)期運(yùn)行中，PCR產(chǎn)物不斷積聚，附著在空氣中的顆粒中，并懸浮于氣體介質(zhì)中形成的膠體分散體系，造成PCR檢驗(yàn)的結(jié)果發(fā)生改變。

   二、實(shí)驗(yàn)室氣溶膠防范措施

   1. 實(shí)驗(yàn)室分區(qū)

   PCR實(shí)驗(yàn)室應(yīng)該按照2002 年公布的《臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室管理暫行辦法》及《醫(yī)療機(jī)構(gòu)臨床擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室管理辦法》 （衛(wèi)辦醫(yī)政發(fā)〔2010〕194號(hào)）規(guī)定分為四區(qū)，分別是試劑準(zhǔn)備區(qū)、標(biāo)本制備區(qū)、PCR擴(kuò)增區(qū)、產(chǎn)物分析區(qū)，前兩區(qū)為擴(kuò)增前區(qū)，后兩區(qū)為擴(kuò)增后區(qū)。擴(kuò)增前區(qū)與擴(kuò)增后區(qū)應(yīng)嚴(yán)格分開，同時(shí)配備通風(fēng)與凈化，形成科室之間的壓差。工作流程，包括實(shí)驗(yàn)材料、試劑、記錄紙、筆、清潔材料等，只能從擴(kuò)增前區(qū)流向擴(kuò)增后區(qū)，即從試劑準(zhǔn)備區(qū)→標(biāo)本處理區(qū)→擴(kuò)增區(qū)→產(chǎn)物分析區(qū)，不得逆向流動(dòng)。嚴(yán)禁在潔凈走廊反向，同時(shí)在各科室、相應(yīng)緩沖間及潔凈走廊之間形成不同梯度的壓差，使空氣流動(dòng)與工作方向相同。

工作流向及空氣流動(dòng)方向

   2. 設(shè)置對(duì)照

   每次實(shí)驗(yàn)前均準(zhǔn)備兩個(gè)陰性對(duì)照（均以水作為模板，一個(gè)與樣品參與核酸提取，另一個(gè)不參與提取，僅在配置擴(kuò)增體系時(shí)加入），以便對(duì)實(shí)驗(yàn)室氣溶膠污染情況進(jìn)行監(jiān)測(cè)，判斷有無污染，是什么原因造成的污染，以便采取措施，防止和消除污染。同時(shí)要設(shè)定一個(gè)陽性對(duì)照，用于監(jiān)測(cè)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠性和準(zhǔn)確性。

   3. 實(shí)驗(yàn)室氣溶膠監(jiān)測(cè)

   采用家用空氣凈化器定期對(duì)實(shí)驗(yàn)室空氣進(jìn)行凈化，將凈化器中的過濾網(wǎng)浸入水中，混勻后，以混合后的水作為樣品進(jìn)行相應(yīng)檢測(cè)，以便及時(shí)了解空氣中氣溶膠的污染情況。定期采集移液槍、提取 儀、擴(kuò)增儀等儀器內(nèi)部及表面的棉拭子樣品進(jìn)行檢測(cè)，以便了解實(shí)驗(yàn)儀器中的污染情況。

   4. 嚴(yán)格的工作流程

   PCR各個(gè)科室分別配備各自的工作服，可以以顏色區(qū)分，進(jìn)入各科室必須更換相應(yīng)的工作服；同時(shí)在潔凈走廊入口配備PCR室專用鞋，進(jìn)入必須更換，各科室前配備氈墊。潔凈走廊中實(shí)驗(yàn)室人員只能從試劑準(zhǔn)備區(qū)方向前往結(jié)果分析區(qū)方向，在條件允許的情況下各科室分別配備不同的人員進(jìn)行操作，避免各科室人員互相竄動(dòng)。

   5. 加強(qiáng)清潔與消毒

   做好實(shí)驗(yàn)室的清潔及消毒工作是防止實(shí)驗(yàn)室內(nèi)發(fā)生氣溶膠污染的有效途徑。實(shí)驗(yàn)室的清潔范圍包括工作臺(tái)面（試驗(yàn)臺(tái)、超凈臺(tái)和存儲(chǔ)柜等）、儀器設(shè)備表面（離心機(jī)的轉(zhuǎn)頭、提取DNA用的加熱塊、擴(kuò)增儀的樣品槽、移液器桿的吸孔、遺傳分析儀的加樣槽等）、重復(fù)使用的工具或器皿等的清潔。

實(shí)驗(yàn)開始前后，先用新鮮配制的10%的次氯酸鈉溶液將上述區(qū)域及儀器的表面反復(fù)擦拭，再用75%乙醇擦洗以去除殘留物，待酒精揮發(fā)后方可進(jìn)行試驗(yàn)。這樣可以有效清除它們表面附著的各種污染物。同時(shí)定期對(duì)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行紫外燈照射消毒。

  6. 提高實(shí)驗(yàn)室人員規(guī)范操作意識(shí)

  定期組織實(shí)驗(yàn)室人員進(jìn)行防污染安全培訓(xùn)，宣講PCR實(shí)驗(yàn)室操作規(guī)范，印發(fā)并講解《醫(yī)療機(jī)構(gòu)臨床擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室管理辦法》（衛(wèi)辦醫(yī)政發(fā)〔2010〕194號(hào)）、《關(guān)于做好血站核酸檢測(cè)工作的通知》（國(guó)衛(wèi)辦醫(yī)發(fā)〔2015〕11號(hào)）、《血站核酸檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量保證指南》、 《法庭科學(xué)DNA實(shí)驗(yàn)室規(guī)范》（GA/T382-2002）、《法庭科學(xué)DNA實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)規(guī)范》（GA/T383-2002）等文件。

實(shí)驗(yàn)室氣溶膠污染是現(xiàn)階段實(shí)驗(yàn)室運(yùn)行中最重要的防范方向，除了上述防范措施之外，實(shí)驗(yàn)室要定期進(jìn)行去除核酸的操作，同時(shí)將質(zhì)量為先，數(shù)量次之，否則一旦出現(xiàn)氣溶膠污染，實(shí)驗(yàn)室將無法繼續(xù)運(yùn)行。氣溶膠污染的結(jié)果會(huì)影響實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)結(jié)果的質(zhì)量，降低檢測(cè)結(jié)果的使用價(jià)值，嚴(yán)重時(shí)會(huì)造成疾病判斷的誤判或錯(cuò)判，不能及時(shí)處理臨床疾病，導(dǎo)致嚴(yán)重經(jīng)濟(jì)損失。實(shí)驗(yàn)室一旦發(fā)現(xiàn)有氣溶膠污染的存在，必須認(rèn)真查找污染源，分析造成的原因，并針對(duì)原因提出相應(yīng)的解決方案，同時(shí)還要對(duì)這一時(shí)期獲得的檢測(cè)數(shù)據(jù)進(jìn)行復(fù)核，查找是否存在未被發(fā)現(xiàn)的污染情況

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